ഹ്യൂമൻ ഇജിഎഫ്ആർ ജീൻ 29 മ്യൂട്ടേഷൻസ് ഡിറ്റക്ഷൻ കിറ്റ് (ഫ്ലൂറസെൻസ് പിസിആർ)-ആർയുഒ
ഉൽപ്പന്ന നാമം
ഹ്യൂമൻ ഇജിഎഫ്ആർ ജീൻ 29 മ്യൂട്ടേഷൻസ് ഡിറ്റക്ഷൻ കിറ്റ് (ഫ്ലൂറസെൻസ് പിസിആർ)-ആർയുഒ
എപ്പിഡെമിയോളജി
ലോകമെമ്പാടുമുള്ള കാൻസർ മരണങ്ങളുടെ പ്രധാന കാരണമായി ശ്വാസകോശ അർബുദം മാറിയിരിക്കുന്നു, ഇത് മനുഷ്യന്റെ ആരോഗ്യത്തിന് ഗുരുതരമായ ഭീഷണിയാണ്. ശ്വാസകോശ അർബുദ രോഗികളിൽ ഏകദേശം 80%-85% പേർക്കും നോൺ-സ്മോൾ സെൽ ലംഗ് കാൻസർ കാരണമാകുന്നു. നോൺ-സ്മോൾ സെൽ ലംഗ് കാൻസർ ചികിത്സയ്ക്കുള്ള ഏറ്റവും പ്രധാനപ്പെട്ട തന്മാത്രാ ലക്ഷ്യം നിലവിൽ EGFR ആണ്. EGFR ന്റെ ഫോസ്ഫോറിലേഷൻ ട്യൂമർ സെൽ വളർച്ച, വ്യത്യാസം, അധിനിവേശം, മെറ്റാസ്റ്റാസിസ്, ആന്റി-അപ്പോപ്റ്റോസിസ്, ട്യൂമർ ആൻജിയോജെനിസിസ് എന്നിവയെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കും. EGFR ടൈറോസിൻ കൈനേസ് ഇൻഹിബിറ്ററുകൾ (TKI) EGFR ഓട്ടോഫോസ്ഫോറിലേഷൻ തടയുന്നതിലൂടെ EGFR സിഗ്നലിംഗ് പാതയെ തടയാൻ കഴിയും, അതുവഴി ട്യൂമർ കോശങ്ങളുടെ വ്യാപനവും വ്യത്യാസവും തടയുന്നു, ട്യൂമർ സെൽ അപ്പോപ്ടോസിസ് പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നു, ട്യൂമർ ആൻജിയോജെനിസിസ് കുറയ്ക്കുന്നു, അങ്ങനെ ട്യൂമർ ടാർഗെറ്റഡ് തെറാപ്പി നേടുന്നു [1]. EGFR-TKI യുടെ ചികിത്സാ ഫലപ്രാപ്തി EGFR ജീൻ മ്യൂട്ടേഷന്റെ നിലയുമായി അടുത്ത ബന്ധമുള്ളതാണെന്നും EGFR ജീൻ മ്യൂട്ടേഷൻ ഉപയോഗിച്ച് ട്യൂമർ കോശങ്ങളുടെ വളർച്ചയെ പ്രത്യേകമായി തടയാൻ കഴിയുമെന്നും ധാരാളം പഠനങ്ങൾ തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട് [2,3]. EGFR ജീൻ ക്രോമസോം 7 (7p12) ന്റെ ചെറിയ കൈയിലാണ് സ്ഥിതി ചെയ്യുന്നത്, പൂർണ്ണ നീളം 200Kb ആണ്, ഇതിൽ 28 എക്സോണുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. മ്യൂട്ടേഷൻ മേഖല പ്രധാനമായും എക്സോൺ 18 മുതൽ 21 വരെ സ്ഥിതിചെയ്യുന്നു, എക്സോൺ 19 ലെ കോഡോണുകൾ 746 മുതൽ 753 വരെ ഇല്ലാതാക്കൽ മ്യൂട്ടേഷൻ ഏകദേശം 45% വരും, എക്സോൺ 21 ലെ L858R മ്യൂട്ടേഷൻ ഏകദേശം 40% മുതൽ 45% വരെ വരും [4]. നോൺ-സ്മോൾ സെൽ ലംഗ് കാൻസർ രോഗനിർണയത്തിനും ചികിത്സയ്ക്കുമുള്ള NCCN മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശങ്ങൾ EGFR-TKI അഡ്മിനിസ്ട്രേഷന് മുമ്പ് EGFR ജീൻ മ്യൂട്ടേഷൻ പരിശോധന ആവശ്യമാണെന്ന് വ്യക്തമായി പറയുന്നു. എപ്പിഡെർമൽ ഗ്രോത്ത് ഫാക്ടർ റിസപ്റ്റർ ടൈറോസിൻ കൈനേസ് ഇൻഹിബിറ്റർ (EGFR-TKI) മരുന്നുകളുടെ അഡ്മിനിസ്ട്രേഷനെ നയിക്കാനും, നോൺ-സ്മോൾ സെൽ ലംഗ് കാൻസർ ഉള്ള രോഗികൾക്ക് വ്യക്തിഗതമാക്കിയ മരുന്നിനുള്ള അടിസ്ഥാനം നൽകാനും ഈ ടെസ്റ്റ് കിറ്റ് ഉപയോഗിക്കുന്നു. നോൺ-സ്മോൾ സെൽ ലംഗ് കാൻസർ ഉള്ള രോഗികളിൽ EGFR ജീനിലെ സാധാരണ മ്യൂട്ടേഷനുകൾ കണ്ടെത്തുന്നതിന് മാത്രമാണ് ഈ കിറ്റ് ഉപയോഗിക്കുന്നത്. പരിശോധനാ ഫലങ്ങൾ ക്ലിനിക്കൽ റഫറൻസിനായി മാത്രമുള്ളതാണ്, രോഗികളുടെ വ്യക്തിഗത ചികിത്സയ്ക്കുള്ള ഏക അടിസ്ഥാനമായി ഇത് ഉപയോഗിക്കരുത്. രോഗിയുടെ അവസ്ഥ, മരുന്നുകളുടെ സൂചനകൾ, ചികിത്സ എന്നിവ ക്ലിനീഷ്യൻമാർ പരിഗണിക്കണം. പ്രതികരണവും മറ്റ് ലബോറട്ടറി പരിശോധന സൂചകങ്ങളും മറ്റ് ഘടകങ്ങളും പരിശോധനാ ഫലങ്ങൾ സമഗ്രമായി വിലയിരുത്താൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു.
ചാനൽ
| പ്രതികരണ ബഫർ | ചാനൽ |
| EGFR IC റിയാക്ഷൻ ബഫർ | FAM ചാനൽ |
| L858R റിയാക്ഷൻ ബഫർ | FAM ചാനൽ |
| 19del റിയാക്ഷൻ ബഫർ | FAM ചാനൽ |
| T790M റിയാക്ഷൻ ബഫർ | FAM ചാനൽ |
| G719X റിയാക്ഷൻ ബഫർ | FAM ചാനൽ |
| 3Ins20 റിയാക്ഷൻ ബഫർ | FAM ചാനൽ |
| L861Q റിയാക്ഷൻ ബഫർ | FAM ചാനൽ |
| S768I റിയാക്ഷൻ ബഫർ | FAM ചാനൽ |
സാങ്കേതിക പാരാമീറ്ററുകൾ
| സംഭരണം | ദ്രാവകം: ≤ -18℃ ഇരുട്ടിൽ |
| ഷെൽഫ്-ലൈഫ് | 12 മാസം |
| മാതൃകാ തരം | പുതിയ ട്യൂമർ ടിഷ്യു, മരവിച്ച പാത്തോളജിക്കൽ വിഭാഗം, പാരഫിൻ-എംബെഡഡ് പാത്തോളജിക്കൽ ടിഷ്യു അല്ലെങ്കിൽ വിഭാഗം, പ്ലാസ്മ അല്ലെങ്കിൽ സെറം |
| CV | 5.0% |
| ലോഡ് | 3ng/μL വൈൽഡ്-ടൈപ്പിന്റെ പശ്ചാത്തലത്തിൽ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് പ്രതിപ്രവർത്തന പരിഹാര കണ്ടെത്തൽ, 1% മ്യൂട്ടേഷൻ നിരക്ക് സ്ഥിരമായി കണ്ടെത്താനാകും; b) ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് പ്രതിപ്രവർത്തനം 1% മ്യൂട്ടേഷൻ നിരക്കിൽ, 1×105 കോപ്പികൾ/mL എന്ന വൈൽഡ്-ടൈപ്പ് പശ്ചാത്തലത്തിൽ 1×103 കോപ്പികൾ/mL മ്യൂട്ടേഷൻ സ്ഥിരമായി കണ്ടെത്താൻ കഴിയും; c) എന്റർപ്രൈസ് ഇന്റേണൽ റഫറൻസിന്റെ ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ ഡിറ്റക്ഷൻ പരിധിയുള്ള റഫറൻസ് ഉൽപ്പന്നമായ SW3, ഇന്റേണൽ റഫറൻസ് റിയാക്ഷൻ സൊല്യൂഷന് കണ്ടെത്താൻ കഴിയും. കിറ്റ് ദേശീയ ഡിറ്റക്ഷൻ പരിധി റഫറൻസ് മെറ്റീരിയൽ കണ്ടെത്തുമ്പോൾ, 2.5% മ്യൂട്ടേഷൻ ഫ്രീക്വൻസി ഡിറ്റക്ഷൻ പരിധി റഫറൻസ് മെറ്റീരിയലും 4 ന്റെ കോപ്പി നമ്പർ വ്യതിയാനമുള്ള EGFR ജീൻ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ മ്യൂട്ടേഷനും സ്ഥിരമായി കണ്ടെത്താൻ കഴിയും. |
| പ്രത്യേകത | വൈൽഡ്-ടൈപ്പ് ഹ്യൂമൻ ജീനോമിക് ഡിഎൻഎയുമായും മറ്റ് മ്യൂട്ടന്റ് തരങ്ങളുമായും ക്രോസ്-റിയാക്റ്റിവിറ്റി ഇല്ല. |
| ബാധകമായ ഉപകരണങ്ങൾ | അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ് 7500 റിയൽ-ടൈം പിസിആർ സിസ്റ്റങ്ങൾ, അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ് 7300 റിയൽ-ടൈം പിസിആർ സിസ്റ്റങ്ങൾ, ക്വാണ്ട്സ്റ്റുഡിയോ® 5 റിയൽ-ടൈം പിസിആർ സിസ്റ്റങ്ങൾ, ലൈറ്റ് സൈക്ലർ® 480 റിയൽ-ടൈം പിസിആർ സിസ്റ്റം, ബയോറാഡ് CFX96 റിയൽ-ടൈം PCR സിസ്റ്റം. |
വർക്ക് ഫ്ലോ
റിയാജന്റുകൾ ആവശ്യമാണ്, പക്ഷേ നൽകിയിട്ടില്ല:DNase/RNase രഹിത ജലം, അൺഹൈഡ്രസ് എത്തനോൾ. പാരഫിൻ-എംബെഡഡ് ടിഷ്യു സാമ്പിൾ പരിശോധിക്കുമ്പോൾ, QIAGEN-ൽ നിന്നുള്ള QIAamp DNA FFPE ടിഷ്യു കിറ്റ് (56404), Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd-ൽ നിന്നുള്ള പാരഫിൻ-എംബെഡഡ് ടിഷ്യു DNA റാപ്പിഡ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ കിറ്റ് (DP330) എന്നിവ ഉപയോഗിക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു. പ്ലാസ്മ/സെറം സാമ്പിൾ പരിശോധിക്കുമ്പോൾ, Jiangsu Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B)-നൊപ്പം ഉപയോഗിക്കാൻ കഴിയുന്ന Macro & Micro-Test General DNA/RNA കിറ്റ് (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) അല്ലെങ്കിൽ QIAGEN-ൽ നിന്നുള്ള QIAamp സർക്കുലേറ്റിംഗ് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് കിറ്റ് (55114) എന്നിവ ഉപയോഗിക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.
ഉപഭോഗവസ്തുക്കൾ ആവശ്യമാണ്, പക്ഷേ നൽകിയിട്ടില്ല: DNase/RNase സൗജന്യ നുറുങ്ങുകൾ, ഡിസ്പോസിബിൾ ഗ്ലൗസുകൾ, DNase/RNase സൗജന്യ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബ്, PCR-നുള്ള 8-ട്യൂബ് സ്ട്രിപ്പുകൾ, സെൻട്രിഫ്യൂജ്.
