കാർബപെനെം പ്രതിരോധ ജീൻ (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
ഉൽപ്പന്ന നാമം
HWTS-OT045 കാർബപെനെം റെസിസ്റ്റൻസ് ജീൻ (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) ഡിറ്റക്ഷൻ കിറ്റ് (ഫ്ലൂറസെൻസ് PCR)
എപ്പിഡെമിയോളജി
കാർബപെനെം ആൻറിബയോട്ടിക്കുകൾ ഏറ്റവും വിശാലമായ ആൻറി ബാക്ടീരിയൽ സ്പെക്ട്രവും ശക്തമായ ആൻറി ബാക്ടീരിയൽ പ്രവർത്തനവുമുള്ള വിഭിന്നമായ β-ലാക്റ്റം ആൻറിബയോട്ടിക്കുകളാണ്. β-ലാക്റ്റമേസിനോടുള്ള സ്ഥിരതയും കുറഞ്ഞ വിഷാംശവും കാരണം, ഗുരുതരമായ ബാക്ടീരിയ അണുബാധകളുടെ ചികിത്സയ്ക്കുള്ള ഏറ്റവും പ്രധാനപ്പെട്ട ആൻറി ബാക്ടീരിയൽ മരുന്നുകളിൽ ഒന്നായി ഇത് മാറിയിരിക്കുന്നു. പ്ലാസ്മിഡ്-മെഡിയേറ്റഡ് എക്സ്റ്റെൻഡഡ്-സ്പെക്ട്രം β-ലാക്റ്റമാസുകൾ (ESBL-കൾ), ക്രോമസോമുകൾ, പ്ലാസ്മിഡ്-മെഡിയേറ്റഡ് സെഫാലോസ്പോരിനേസുകൾ (AmpC എൻസൈമുകൾ) എന്നിവയ്ക്ക് കാർബപെനെമുകൾ വളരെ സ്ഥിരതയുള്ളവയാണ്.
ചാനൽ
| പിസിആർ-മിക്സ് 1 | പിസിആർ-മിക്സ് 2 | |
| ഫാം | ഐ.എം.പി. | വിഐഎം |
| വിഐസി/ഹെക്സ് | ആന്തരിക നിയന്ത്രണം | ആന്തരിക നിയന്ത്രണം |
| സി.വൈ.5 | എൻ‌ഡി‌എം | കെപിസി |
| റോക്സ് | ഓക്സ48
| ഓക്സ23 |
സാങ്കേതിക പാരാമീറ്ററുകൾ
| സംഭരണം | ≤-18℃ |
| ഷെൽഫ്-ലൈഫ് | 12 മാസം |
| മാതൃകാ തരം | കഫം, ശുദ്ധമായ കോളനികൾ, മലാശയ സ്വാബ് |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5.0% |
| ലോഡ് | 103സി.എഫ്.യു/എം.എൽ |
| പ്രത്യേകത | a) കിറ്റ് സ്റ്റാൻഡേർഡ് ചെയ്ത കമ്പനി നെഗറ്റീവ് റഫറൻസുകൾ കണ്ടെത്തുകയും ഫലങ്ങൾ അനുബന്ധ റഫറൻസുകളുടെ ആവശ്യകതകൾ നിറവേറ്റുകയും ചെയ്യുന്നു. b) ക്രോസ്-റിയാക്റ്റിവിറ്റി പരിശോധനയുടെ ഫലങ്ങൾ കാണിക്കുന്നത് ഈ കിറ്റിന് മറ്റ് ശ്വസന രോഗകാരികളായ ക്ലെബ്‌സിയല്ല ന്യുമോണിയ, അസിനെറ്റോബാക്റ്റർ ബൗമാനി, സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ, സ്ട്രെപ്റ്റോകോക്കസ് ന്യുമോണിയ, നീസീരിയ മെനിഞ്ചിറ്റിഡിസ്, സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ്, ക്ലെബ്‌സിയല്ല ഓക്‌സിറ്റോക്ക, ഹീമോഫിലസ് ഇൻഫ്ലുവൻസ, അസിനെറ്റോബാക്റ്റർ ജൂനി, അസിനെറ്റോബാക്റ്റർ ഹീമോലിറ്റിക്കസ്, ലെജിയോണല്ല ന്യൂമോഫില, എസ്‌ഷെറിച്ചിയ കോളി, സ്യൂഡോമോണസ് ഫ്ലൂറസെൻസ്, കാൻഡിഡ ആൽബിക്കൻസ്, ക്ലമീഡിയ ന്യുമോണിയ, റെസ്പിറേറ്ററി അഡെനോവൈറസ്, എന്ററോകോക്കസ്, അല്ലെങ്കിൽ മറ്റ് മയക്കുമരുന്ന് പ്രതിരോധശേഷിയുള്ള ജീനുകൾ അടങ്ങിയ സാമ്പിളുകൾ CTX, mecA, SME, SHV, TEM മുതലായവയുമായി ക്രോസ്-റിയാക്റ്റിവിറ്റി പരിശോധനയുടെ ഫലങ്ങൾ കാണിക്കുന്നു. സി) ആന്റി-ഇടപെടൽ: മ്യൂസിൻ, മിനോസൈക്ലിൻ, ജെന്റാമൈസിൻ, ക്ലിൻഡാമൈസിൻ, ഇമിപെനെം, സെഫോപെരാസോൺ, മെറോപെനെം, സിപ്രോഫ്ലോക്സാസിൻ ഹൈഡ്രോക്ലോറൈഡ്, ലെവോഫ്ലോക്സാസിൻ, ക്ലാവുലാനിക് ആസിഡ്, റോക്സിത്രോമൈസിൻ എന്നിവ ഇടപെടൽ പരിശോധനയ്ക്കായി തിരഞ്ഞെടുത്തു, മുകളിൽ സൂചിപ്പിച്ച ഇടപെടൽ പദാർത്ഥങ്ങൾക്ക് കാർബപെനെം പ്രതിരോധ ജീനുകൾ KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM, IMP എന്നിവ കണ്ടെത്തുന്നതിന് തടസ്സപ്പെടുത്തുന്ന പ്രതികരണമില്ലെന്ന് ഫലങ്ങൾ കാണിക്കുന്നു. |
| ബാധകമായ ഉപകരണങ്ങൾ | അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ് 7500 റിയൽ-ടൈം പിസിആർ സിസ്റ്റങ്ങൾ QuantStudio®5 റിയൽ-ടൈം PCR സിസ്റ്റങ്ങൾ SLAN-96P റിയൽ-ടൈം PCR സിസ്റ്റംസ് (ഹോങ്ഷി മെഡിക്കൽ ടെക്നോളജി കമ്പനി, ലിമിറ്റഡ്) LightCycler®480 റിയൽ-ടൈം PCR സിസ്റ്റം ലൈൻജീൻ 9600 പ്ലസ് റിയൽ-ടൈം പിസിആർ ഡിറ്റക്ഷൻ സിസ്റ്റം (എഫ്ക്യുഡി-96എ,ഹാങ്‌ഷൗബയോർ ടെക്നോളജി) MA-6000 റിയൽ-ടൈം ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് തെർമൽ സൈക്ലർ (സുഷൗ മൊളാറെ കമ്പനി, ലിമിറ്റഡ്) ബയോറാഡ് CFX96 റിയൽ-ടൈം PCR സിസ്റ്റം ബയോറാഡ് CFX ഓപസ് 96 റിയൽ-ടൈം PCR സിസ്റ്റം |
വർക്ക് ഫ്ലോ
ഓപ്ഷൻ 1.
ശുപാർശ ചെയ്യുന്ന എക്സ്ട്രാക്ഷൻ റീജന്റ്: മാക്രോ & മൈക്രോ-ടെസ്റ്റ് ജനറൽ ഡിഎൻഎ/ആർഎൻഎ കിറ്റ് (HWTS-301)9-50, എച്ച്ഡബ്ല്യുടിഎസ്-3019-32, എച്ച്ഡബ്ല്യുടിഎസ്-3019-48, എച്ച്ഡബ്ല്യുടിഎസ്-3019-96) (ഇത് മാക്രോ & മൈക്രോ-ടെസ്റ്റ് ഓട്ടോമാറ്റിക് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എക്സ്ട്രാക്റ്ററിനൊപ്പം (HWTS-3006C, HWTS-3006B) ഉപയോഗിക്കാം) ജിയാങ്‌സു മാക്രോ & മൈക്രോ-ടെസ്റ്റ് മെഡ്-ടെക് കമ്പനി ലിമിറ്റഡ് നിർമ്മിച്ചതാണ്. 200μL സാധാരണ ഉപ്പുവെള്ളം താലസ് അവക്ഷിപ്തത്തിലേക്ക് ചേർക്കുക. തുടർന്നുള്ള ഘട്ടങ്ങൾ വേർതിരിച്ചെടുക്കുന്നതിനുള്ള നിർദ്ദേശങ്ങൾ പാലിക്കണം, കൂടാതെ ശുപാർശ ചെയ്യുന്ന എല്യൂഷൻ അളവ്100μL.
ഓപ്ഷൻ 2.
ശുപാർശ ചെയ്യുന്ന എക്സ്ട്രാക്ഷൻ റീജന്റ്: ടിയാൻജെൻ ബയോടെക് (ബീജിംഗ്) കമ്പനി ലിമിറ്റഡിന്റെ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ അല്ലെങ്കിൽ പ്യൂരിഫിക്കേഷൻ റീജന്റ് (YDP302). ഉപയോഗത്തിനുള്ള നിർദ്ദേശത്തിലെ ഘട്ടം 2 അനുസരിച്ച് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ കർശനമായി ആരംഭിക്കണം (താലസ് അവക്ഷിപ്തത്തിലേക്ക് 200μL ബഫർ GA ചേർക്കുക, താലസ് പൂർണ്ണമായും സസ്പെൻഡ് ചെയ്യപ്പെടുന്നതുവരെ കുലുക്കുക). എല്യൂഷനായി RNase/DNase രഹിത വെള്ളം ഉപയോഗിക്കുക, ശുപാർശ ചെയ്ത എല്യൂഷൻ അളവ് 100μL ആണ്.
ഓപ്ഷൻ 3.
ശുപാർശ ചെയ്യുന്ന എക്സ്ട്രാക്ഷൻ റീജന്റ്: മാക്രോ & മൈക്രോ-ടെസ്റ്റ് സാമ്പിൾ റിലീസ് റീജന്റ്. മുകളിൽ സൂചിപ്പിച്ച താപ അവശിഷ്ടത്തിൽ 1 മില്ലി സാധാരണ ഉപ്പുവെള്ളം ചേർത്ത് കഫം സാമ്പിൾ കഴുകണം, 13000r/മിനിറ്റിൽ 5 മിനിറ്റ് സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യണം, തുടർന്ന് സൂപ്പർനേറ്റന്റ് ഉപേക്ഷിക്കണം (10-20µL സൂപ്പർനേറ്റന്റ് സൂക്ഷിക്കണം). ശുദ്ധമായ കോളനി, റെക്ടൽ സ്വാബ് എന്നിവയ്ക്കായി, മുകളിൽ സൂചിപ്പിച്ച താപ അവശിഷ്ടത്തിലേക്ക് 50μL സാമ്പിൾ റിലീസ് റീജന്റ് നേരിട്ട് ചേർക്കുക, തുടർന്ന് ഉപയോഗത്തിനുള്ള നിർദ്ദേശങ്ങൾ അനുസരിച്ച് തുടർന്നുള്ള ഘട്ടങ്ങൾ വേർതിരിച്ചെടുക്കണം.
